GIBCO 16140-071熱滅活胎牛血清FBS幾大特點(diǎn)

根據血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現出黃色或紅色，我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl，實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無(wú)直接影響，這個(gè)指標的意義在于能體現出采血過(guò)程的嚴謹規范程度，良好的操作能降低血清的溶血。
國產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散，大多是由屠戶(hù)采血后馬上離心收集，所以很少會(huì )有溶血，表現出明亮的蠟黃色，當然，國產(chǎn)血清也很少有標準意義上的胎牛血清。

主要技術(shù)指標
目前國內血清的質(zhì)量標準是2005版的《中華人民共和國藥典》，主要指標有以下幾點(diǎn)：

1、內毒素
標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分，因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產(chǎn)一系列過(guò)程中的無(wú)菌操作情況。目前，國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求，很多進(jìn)口胎牛血清內毒素含量反而更高，如Gibco 26140，只要求不高于50EU/ml，高出我國標準10倍，即使是16000，也要10EU/ml，血清質(zhì)量也未見(jiàn)影響?？梢?jiàn)，內毒素含量偏高不影響質(zhì)量，除非含量*，預示著(zhù)已經(jīng)污染。

2、總蛋白含量
胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml，數值偏高，說(shuō)明采血的牛齡偏大，不是胎牛，數值偏低，表明血清可能摻水了。

3、血紅蛋白
標準為不高于20mg/dl，顏色越紅，數值越高，反之，數值越低。

4、pH
國產(chǎn)血清，大多高于7.5，進(jìn)口胎牛血清，大多低于7.5，具體原因未知，可能和牛齡有關(guān)，這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。

5、微生物
包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類(lèi)病原性病毒等。隨著(zhù)國內血清廠(chǎng)家生產(chǎn)條件的改善提高，細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制，支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾，大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的，主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入，又無(wú)法過(guò)濾，很難*清除，但對血清質(zhì)量影響不大。病原性病毒，特別是BVDV，在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在，這類(lèi)微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一，而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白
國產(chǎn)血清的只是定性檢測，結果也很不準確，進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能*體現出采血的時(shí)的牛齡情況，國產(chǎn)血清，基本都是新生牛的，血清中容易產(chǎn)生IgM，IgG的含量也偏高，進(jìn)口胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也較低。

7、其它
不管是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清，都是不測抗生素的(無(wú)四環(huán)素胎牛血清除外)。國外，抗生素的使用很?chē)栏?，用量也很少，每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內，抗生素的濫用已成了普遍現象，血清中殘留很高，對細胞培養極為不利，這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。

牛血清質(zhì)量檢定指標：

1、化學(xué)檢定：包括滲透壓（240～340）、pH（7.0～8.0）、總蛋白含量（3.5～5.0％）、血紅蛋白 （≤0.02％）
2、 微生物檢查：細菌和真菌——直接培養法、噬菌體——噬斑法和增殖法 支原體——培養法和DNA染色法 、牛病毒——細胞培養法。要求均為陰性
3、 內毒素檢測——凝膠法和動(dòng)態(tài)濁度法 要求內毒素含量≤10EU/ml
4、 促細胞生長(cháng)測定（SP2/0-Ag14標準規定）
a.zui大增殖濃度≥1.0×106個(gè)/ml、倍增時(shí)間≤20小時(shí) 克隆率＝（陽(yáng)性孔平均數/培養孔總數）×100％
b.貼壁效率（ VERO細胞、二倍體細胞等） 10％血清――50或100個(gè)細胞/孔
貼壁效率（％）＝（每孔克隆平均數/每孔存活的培養細胞平均數）×100 相對貼壁效率＝被測血清貼壁效率/參考血清貼壁效